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- 序言
- 个人电脑配置
- 采用的方案
- 安装anaconda
- 在anaconda中配置(默认通道)清华镜像源
- 安装pycharm
- pycharm导入anaconda
- 安装CUDA
- 安装cuDNN
- 安装TensorFlow(GPU版)
- 个人感悟
- 安装过程第一问题:anaconda配置清华镜像源
- 安装过程第二个问题:cudnn安装错误
- 安装过程第三个问题:网络问题
不论你准备安装哪种版本的tensorflow gpu版本,都希望你先将文章浏览完毕,再进行版本选择和安装(安装需要的链接文章内都有,还有个人问题探讨),尽可能减少安装错误,节约安装时间。
- CPU i5-9300H
- GPU GTX1650
- windows系统 20H2
Anaconda3-2020.11-Windows-x86_64(内置Python3.8版本解释器) PyCharm 2020.3.3 TensorFlow 2.4 + CUDA 11.0 + CuDNN 8.04
-
第一步:下载安装包
Anaconda官方的下载地址是:进入官方地址
下载后的安装包,内置Python3.8版本解释器 如果官网下载网速太慢可以使用清华大学的镜像网站
-
第二步:安装
1.找到安装包,右键选择管理员打开 点击next 点击 I Agree 选择 Just Me 我的电脑有500G固态,所以选择默认安装路径 选中第一个方框(添加路径到用户变量) 选中第二个方框(默认Python解释器为3.8版本) 点击 Install,进行安装 安装过后,继续点击next 再次点击next, 取消选中,点击finish
-
第三步:测试是否安装成功
之后依次单击:开始(windows菜单键) -> Anaconda3 (64bit) -> 【【淘密令】】,打开【【淘密令】】窗口,它与CMD控制台类似,输入命令就可以控制和配置python。 验证Python,在控制台中输入Python,若是安装正确,会打印Python的版本号以及控制符号
-
第四步:使用conda命令
在Anaconda中最常用的是conda命令,该命令可以执行一些操作。
-
查看已安装的第三方类库的代码
如果此时控制台命令行还在>>>状态,需要先输入exit(),回车;然后在控制台输入:conda list
-
使用如下conda命令可以安装第三方库(注:name,是第三方库的名字):conda install name
-
可以查看清华镜像帮助 打开【【淘密令】】【【微信】】> environment ->channels -> add 分别添加一下三条命令,
下划界面,删除default通道,点击Update channels,等待一段时间,出现如下界面 同时系统会自动在用户目录下面生成.condarc文件
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第一步:PyCharm的下载和安装
pycharm下载地址
左边是专业版需要付费,右边使社区版免费使用,这里建议选择免费的社区版
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第二步:安装
右键管理员权限打开,进入安装界面直接点击Next按钮,进行安装 选择安装路径,可以选择安装在C盘,也可以选择其他盘安装
选择与已安装的Python相同位数的文件,我的电脑是64位操作系统,选择64bit(1), 添加路径变量(2),选择添加打开文件夹项目(3),选择关联.py文件(4),然后点击next 点击安装
点击finish,完成安装
-
第三步:创建一个新的工程
双击桌面的pycharm图标出现下面的界面,点Create New Project,创建一个新的工程 Location是我们存放工程的路径,也可以自己设置存储文件夹替换PycharmProjects,然后点击create创建一个新的项目
打开pycharm建立好的工程crawler(这是我之前建立的) 打开pycharm点击 File->setting 点击 Project:crawler->Python Interpreter (下面红色字体部分会提示未发现Python工具包)
点击右侧设置按钮
出现以下界面 点击Add添加解释器 点击 【【微信】】> … ->选择路径(找到Anaconda的安装路径在(C:?\Firefly\anaconda3 -> tool -> python.exe) 点击OK,等待一会,会显示有很多包
选择的框架是:TensorFlow2.4 + CUDA11.1 + cuDNN v8.0.4 官方网址
-
第一步:下载CUDA 我的网盘链接: 链接:https://pan.baidu.com/s/1N4AXz【【微信】】 提取码:rmnt
-
第二步:安装
选中第三个.exe文件,右键以管理权限运行 选择默认安装路径(不要修改安装路径): 安装文件会自动是否与当前显卡系统兼容,然后点击同意并继续 选择自定义 第一次安装全部选中,点击下一步(多次安装只用选第一个就可以): 选择默认安装路径 选中,点击next,进行安装,安装过程或出现屏幕闪烁 安装完成,取消选中,点击关闭
第三步:检测是否安装成功
安装完成后,按Win+R打开运行窗口,输入cmd回车,随后输入nvcc -V来检测是否安装成功
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第四步:测试CUDA
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进入到cuda的安装路径,C:\【【淘密令】】\NVIDIA GPU Computing Toolkit\CUDA\v11.0\【【微信】】\demo_suite,找到de【【微信】】.exe,bandwidthTest.exe两个文件
-
windows + R 并输入 cmd打开控制,将de【【微信】】.exe拉入控制台,出现一下界面
-
然后再将bandwidthTest.exe拉入控制台,出现如下界面,则代代表cuDNN也安装成功
-
官方链接
- 第一步:下载软件 我的网盘链接 链接:https://pan.baidu.com/s/1nGuThzyU43bG【【微信】】 提取码:hru9
下载之后得到一个压缩包
-
第二步:安装cuDNN
查看CUDA安装路径:开始 -> 设置 -> 系统 -> 关于 -> 高级系统设置 -> 环境变量 解压cuddn文件,并将解压后的三个文件夹(bin include lib)直接复制到CUDA安装路径下(C:\【【淘密令】】\NVIDIA GPU Computing Toolkit\CUDA\v11.0)
-
第三步:环境变量配置
安装好CUDA之后,系统变量会有两个CUDA的安装路径 现在需要再添加一个CUDA文件的路径,首先找到包含cupti64_XXX.dll文件的路径(C:\【【淘密令】】\NVIDIA GPU Computing Toolkit\CUDA\v11.0\【【微信】】\CUPTI\lib64),并复制 新建系统环境变量,注意:新建变量名不能与已有的相同否则会覆盖已有的变量名 再添加cuDNN文件的路径,首先找到包含cudnn64_8.dll文件的路径(C:\【【淘密令】】\NVIDIA GPU Computing Toolkit\CUDA\v11.0\bin) 新建环境变量,注意:新建变量名不能与已有的相同否则会覆盖已有的变量名 完成环境变量配置 注意: 即使cudnn安装失败也不会影响tensorflow gpu安装,只会影响tensorflow测试
-
安装tensorflow2.4.0
打开【【淘密令】】 输入以下命令
-
检测是否安装成功
打开【【淘密令】】控制台: 输入 ipython 回车 再输入 import tensorflow as tf 回车 接着输入 tf.config.list_physical_devices(‘GPU’) 回车 出现一下界面,即安装成功 进一步测试,分别输入以下语句:
出现一下界面: 或者打开pycharm,新建一个项目,在mian.py文件中输入以下代码:
1.配置tensorflow gpu版本确实耗费时间和功夫,安装过程需要耐心,没安装一项立刻进行检测,以免影响后续工作。
2.安装过程中还下载了tensorflow2.0版本的资源包(anaconda 3.6 + cuda 10.0 + cudnn 7.5),参考清华大学,王晓华著的《TensorFlow 2.0 卷积网络实战》进行安装。 链接:https://pan.baidu.com/s/1UXIrg6HGEYb_DAEajIneyA 提取码:9vem
3.安装过程中还下载cudnn的其它版本 链接:https://pan.baidu.com/s/10RDai【【微信】】 提取码:hdt5 (1x.x 表示CUDA版本号,x 64表示64位操作系统,v x.x.x表示cudnn版本号):
4.安装过程出现了三个问题:现在写出来与大家分享,希望大家遇到此类问题时可以更快的解决。
问题说明,之前都是在安装目录下建立pip文件夹,并建立pip.ini文本:
-
首先我们在C:?或者用户)\电脑的用户名\目录下,新建一个名为pip的文件夹
-
在pip文件夹中新建一个名为pip的文本文档
-
打开pip.txt,在文档中输入以下内容
-
保存关闭此文档,重命名为pip.ini
但是下载tensorflow时一只存在下载中断的问题,最后采用在anaconda na【【微信】】中配置通道。
-
cudnn安装错误
安装cudnn时安装方法错误,直接将cudnn文件解压到CUDA安装目录之下,设置环境变量。
-
cudnn正确安装方法
正确的做法是:解压cudnn压缩包,然后将cudnn下面的三个文件夹复制到cuda安装路径下,并配置bin(cudnn运行路径) 、lib64(cuda运行路径)环境变量名。
- 网络问题 利用【【淘密令】】命令下载tensorflow2.4 gpu版本一直出错,这个可能跟校园网限制访问有关系,下载失败持续了一周,前后卸载、安装进行了多次,已经打算全部卸载换版本进行了,想着再试一次,结果竟然成功了。哈哈,后来仔细想想应该是校园网的问题。
FlowJo 中文实用手册 南京廖华答案网
flowjo数据导出,flowjo分析细胞周期,flowjo使用教程,flowjo如何调节横坐标轴范围文章发布时间 : 2023/4/18 21:05:36星期二
FlowJo中文实用手册
(软件版本:FlowJo7.6.5 2012/06/20 更新)
第一章 FlowJo简介......................................................................................................................................1 \r ?
一、FlowJo对电脑配置的要求...............................................................................................................1 \r ?二、FlowJo的安装过程(Windows).........................................................................................................1 \r ?三、FlowJo的工作台...............................................................................................................................5 \r ?第二章 FlowJo分析单标样本......................................................................................................................6 \r ?
一、由原始数据生成单参数直方图的过程...........................................................................................6 \r ?二、图形的输出和保存.........................................................................................................................10 \r ?第三章 FlowJo分析多色标记样本............................................................................................................13 \r ?
一、由原始数据生成二维点图的过程.................................................................................................13 \r ?二、二维点图的设门原则.....................................................................................................................16 \r ?三、多色标记分析说明.........................................................................................................................16 \r ?第四章 FlowJo软件荧光补偿....................................................................................................................18 \r ?
一、用FlowJo做荧光补偿并进行数据分析的步骤..............................................................................18 \r ?二、FlowJo荧光补偿的具体步骤.........................................................................................................18 \r ?三、双指数转换.....................................................................................................................................24 \r ?第五章 FlowJo的批处理功能....................................................................................................................27 \r ?
一、设门分析的批处理.........................................................................................................................27 \r ?二、表格分析的批处理.........................................................................................................................32 \r ?三、图形分析的批处理.........................................................................................................................35 \r ?第六章 FlowJo分析细胞凋亡样本............................................................................................................43 \r ?
一、细胞凋亡概述.................................................................................................................................43 \r ?二、FlowJo分析凋亡数据的过程.........................................................................................................44 \r ?三、凋亡数据结果分析.........................................................................................................................45 \r ?
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第七章 FlowJo软件分析细胞周期样本....................................................................................................47 \r ?
一、细胞周期分析概述.........................................................................................................................47 \r ?二、FlowJo分析细胞周期数据的过程.................................................................................................48 \r ?三、细胞周期拟合的调整方法和步骤.................................................................................................51 \r ?四、细胞周期结果分析.........................................................................................................................53 \r ?
FlowJo中文实用手册II \r ?
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FlowJo中文实用手册III \r ?
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第一章 FlowJo简介
FlowJo是美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS机器的发明者)实验室在90年代研发的一款流式数据分析软件。FlowJo由于功能强大,简单易用,已经被领域内的科学家、实验室广泛引用;同时FlowJo也是各高影响力核心期刊引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo对电脑配置的要求
1. PC电脑:
操作系统:Windows XP,Vista,【【微信】】 内存:512MB及以上
网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接; 加密狗无需网络 2. 苹果电脑:
操作系统:OSX10.3或者更高版本 内存:512MB及以上
网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接加; 密狗无需网络
二、FlowJo的安装过程(Windows)
? 请到我们的网站上下载最新版本:
【【网址】】/content/download 1 \r ?
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在此,我们下载V7.6.5 为例
【【网址】】/sites/default/files/7.6.5_X32.exe 将文件下载到桌面之后,就可以看到FlowJo安装程序图标。
? 双击FlowJo安装程序 ? 屏幕上出现解压进程窗口:
? 解压完成后出现安装窗口:
? 选择“NEXT”
2 \r ?
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? 选择“NEXT”
? 选择“NEXT”
? 选择“Install”软件自动安装。 ? 软件安装完成后显示
? 选择“Done”进入软件版权信息窗口
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? 根据不同软件的授权方法,进行以下操作:
a. 购买的加密狗:先在电脑上插入加密狗(【【微信】】),然后启动FlowJo。 b. 购买的序列号:在序列号栏输入序列号(【【微信】】),然后点击Use 【【微信】】按钮。
c. 如果是初次试用,需要申请序列号:点击 【【微信】】按钮,在FlowJo官方网站申请试用序列号。收到注册邮箱里的序列号之后,将试用序列号输入序列号栏,点击Use 【【微信】】按钮。
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d. 使用Demo模式:如果试用序列号已经过期,而且需要继续学习FlowJo,点击Run in Demo Mode按钮,在Demo模式下使用FlowJo提供的Demo数据进行数据分析。
三、FlowJo的工作台
双击桌面FlowJo软件图标,进入软件工作台。
或者
软件工作台由菜单栏、常用工具栏、组空间和样本空间组成。
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第二章 FlowJo分析单标样本
单标记样本数据常用的显示方式是单参数直方图。单参数直方图是一维数据用的最多的图形显示形式,既可以用于定性分析,又可以用于定量分析。横坐标可以是线性标度或对数标度,单位用“通道数”或者“道数”来表示,在流式检测中的含义是代表所检测的荧光或散射光的强度。纵坐标表示的是横坐标某一特定荧光强度的细胞数,有时也用相对百分比来表现。
一、由原始数据生成单参数直方图的过程
原始数据:手册中提到的演示数据,可以在flowjochina的网站上下载 【【网址】】/sites/default/files/demodata.rar 选择3 color comp文件夹中的Cy5PE comp.fcs进行分析演示。将此文件夹存放到桌面。
1. 2.
双击桌面FlowJo软件图标,进入软件工作台。 把“3 color comp”数据文件夹从桌面上拖入FlowJo。
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? 在组空间中单击选中“3 color comp”组,此时在样本空间里显示“3 color comp”组中的所有样本。
? 在样本空间中双击“Cy5PE comp.fcs”,出现图形窗口。
图形窗口显示为二维点图。
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1) X轴选择SSC(侧向散射,侧向散射的含义:它对细胞膜、细胞质和核膜的折射更为敏感,其散射强度几乎与细胞内颗粒结构的质量成近似直线关系,也就是说,细胞内颗粒结构越复杂,质量越大,其SSC越大;反之则越小)
2) Y轴选择FSC(前向散射,前向散射的含义:该值的大小与细胞的直径近似直线关系,也就说,对于不同的细胞,细胞越大,其FSC就越大;反之则越小) 3) 然后选择设门工具(矩形门
、椭圆门
、多边形门
、自动门
)中任意一个,在二维点图中选中淋巴细胞。
如下图所示: 图中用圆圈所选中区域为淋巴细胞
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? 在图形窗口中双击选中的淋巴细胞,生成新的图形窗口。
1) 在X轴选择Cy5PE:CD4,Y轴选择Histogram, 2) 选择设门工具(区域门图中设门。
a. 双分门设门如下图所示:
、双分门
)中任意一个,在单参数直方
左边区域为CD4阴性细胞,右边区域为CD4阳性细胞
9 \r ?
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b. 区域门设门如下图所示:
左边区域为CD4阴性细胞,右边区域为CD阳性细胞
二、图形的输出和保存 \r ?
a. 在单参数图上点击鼠标右键选择复制图片,可以把图片粘贴到
WORD或PPT中。
b. 在图形分析窗口菜单栏中选择“文件”并单击,选择下拉菜单中的“另
存为”,选择保存位置、重新命名文件名以及保存的文件类型(SVG、PNG、EMF、JPG)。
10 \r ?
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c. 在FlowJo工作台单击打开布局编辑器。
d. 在样本空间中,把淋巴细胞的节点拖入到布局编辑器中。
淋巴细胞节点如下图所示:
布局编辑器显示的单参数直方图如下图所示:
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e. 在布局编辑器中点击保存按钮,在弹出的对话框中选择保存的
路径,更改保存的图片名称以及图片格式。 备注:
① 可以在图片名称后面直接输入需要保存的格式,比如命名并保存为:data001.JPG。可以保存的图片格式有:JPG, PNG, GIF, EMF, SVG, PDF。
② FlowJo默认的图片格式为PNG格式 f. 更改布局编辑器输出的默认图片格式的步骤:
① 到工作台的菜单栏中点击“编辑”菜单,在下拉列表中选择“偏好设置”,在偏好设置对话框中选择“文件格式”
② 点击在布局编辑器项目下拉按钮,选择需要的图片格式:
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第三章 FlowJo分析多色标记样本
多色标记样本,包含双标记、三标记及以上的样本。多色标记样本分析的原则是把多色标记简化为单标记或双标记。多色标记样本在采集或数据处理过程中需要做荧光补偿。在FlowJo中的数据显示方式是二维点图。二维点图能够显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系,横坐标和纵坐标分别代表与细胞有关的两个独立参数,平面上的每一个点表示具有相应坐标值的细胞。一般来说可以由一个二维点图得到两个一维直方图,但是由于多个细胞具有相同二维坐标现象的存在,所以二维点图的信息量要大于两个一维直方图的信息量。二维点图在设十字门之后被分成四个区域,实验目的不同,各个区域所代表的含义不同。本手册提供参考的是三标记样本的分析步骤。只要灵活掌握分析技巧,根据实验需求学会把多色分析简化,这样就可以做到事半功倍的效果。
一、由原始数据生成二维点图的过程
原始数据:为FlowJo演示数据,选择3-color-【【淘密令】】文件夹中的931115-【【微信】】.FCS进行分析演示。
1. 打开软件,将“3-color-【【淘密令】】”文件夹拖入FlowJo工作台。
2. 在样本空间中双击“931115-【【微信】】.FCS”样本,出现图形窗口,显示为二维点图。X轴选择FSC,Y轴选择SSC。然后选择多边形设门工具在二维点图中选中淋巴细胞。如下图所示:
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,
3. 双击淋巴细胞门,出现图形窗口,X轴选择Fluor::CD3,Y轴选择FSC。使用矩形设门工具
选中CD3阳性细胞,设门并命名为T细胞
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4. 双击T细胞门,出现图形窗口,在X轴选择Cy5PE::CD4,Y轴选择PhyEry::CD8,使用十字门工具
设门,如下图所示:
Q1:CD8单阳性细胞,为CD8+ T细胞 Q2:双阳性细胞
Q3:CD4单阳性细胞,为CD4+ T细胞 Q4:双阴性细胞
四分门更改门位置的方法:
单击四分门“十字”的交点选中这个四分门,如下图所示。拖动鼠标将四分门移到目标位置。
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二、二维点图的设门原则
二维点图常用四分门来设门,四分门设门要根据阴性对照界定阴性区。根据细胞分群的趋势,四分门的界定线可设在阴性、阳性细胞的分群处。
三、多色标记分析说明
多色样本分析在实验中具有重要的地位,很多用户对多色分析感觉无从下手。其实,流式分析中结果的显示一般都是一维和二维的。因此,在流式分析中无论是几色标记的样本,只要把多色的分析简化为单标记和双标记的分析,问题就会迎刃而解。
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比如:检测TREG需要标记CD4/CD25/FOXP3,可以用SSC vs. CD4的二维点图,把CD4+的细胞圈出来。然后用CD25 vs. FOXP3的二维点图,把CD25+/FOXP3+的细胞表示出来。这样就可以把CD4+/CD25+/FOXP3+的TREG细胞辨别出来。上面的实例就是把三标记的样本转化为两个二维的点图进行分析。
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第四章 FlowJo软件荧光补偿
在做多色流式实验的时候,荧光补偿是必需进行的步骤。FlowJo可以根据荧光补偿单染对照管的数据生成补偿矩阵,并可以对补偿矩阵进行调整。
一、用FlowJo做荧光补偿并进行数据分析的步骤
1. 在补偿编辑器中导入单染管的数据并生成荧光补偿矩阵 2. 将补偿矩阵应用到组,对组里面的所有数据进行荧光补偿 3. 对补偿过的参数轴启用双指数转换功能
二、FlowJo荧光补偿的具体步骤
如果荧光补偿单染对照的数据很好,阴性细胞群和阳性细胞群的分群很明显,只需要将单染管的数据导入FlowJo的补偿编辑器里,FlowJo能自动设门,界定出阴性细胞群和阳性细胞群,并计算出荧光补偿矩阵。操作非常简单,下面的4个步骤便可